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DNA探针从基因文库获取目的基因 是不是把想要的目的基因的互补链 导入用ph处理变质为单链的基因库中 如...DNA探针从基因文库获取目的基因 是不是把想要的目的基因的互补链 导入用ph处理
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DNA探针从基因文库获取目的基因 是不是把想要的目的基因的互补链 导入用ph处理变质为单链的基因库中 如...
DNA探针从基因文库获取目的基因 是不是把想要的目的基因的互补链 导入用ph处理变质为单链的基因库中 如果出现杂交带就说明此基因是所需的目的基因呢
DNA探针从基因文库获取目的基因 是不是把想要的目的基因的互补链 导入用ph处理变质为单链的基因库中 如果出现杂交带就说明此基因是所需的目的基因呢
▼优质解答
答案和解析
DNA探针从基因文库获取目的基因不是把想要的目的基因的互补链,也不是导入用ph处理变质为单链的基因库中,这个过程不需要模板,但需要知道其序列,以构建探针去捕获目的基因哦~
过程大致如下：
首先把属于一个文库的细菌或噬菌体以较低密度接种在培养皿上以取得相当分散的菌落或噬菌斑,然后用硝酸纤维滤膜吸印,使培养皿和滤膜的相对应的位置上具有相同的克隆.同时另行制备供分子杂交用的探针.为了筛选真核生物的某种基因,常从它的转录产物mRNA经反向转录（见中心法则）合成相应的互补 DNA(cDNA),再加入用32P标记的核苷三磷酸,用DNA多聚酶I切口移位方法制成有同位素标记的探针.把探针 DNA和硝酸纤维滤膜上的菌落或噬菌体分别进行变性处理,然后进行分子杂交.再将 X光底片覆盖在经过处理的滤膜上以进行放射自显影.在培养皿上找出和 X光底片上的黑点相对应的菌落或噬菌斑,这些菌落或噬菌体中便包含着所需要的基因.经过扩增便能得到大量的细菌或噬菌体,从中可以分离出所需基因的DNA片段.
过程大致如下：
首先把属于一个文库的细菌或噬菌体以较低密度接种在培养皿上以取得相当分散的菌落或噬菌斑,然后用硝酸纤维滤膜吸印,使培养皿和滤膜的相对应的位置上具有相同的克隆.同时另行制备供分子杂交用的探针.为了筛选真核生物的某种基因,常从它的转录产物mRNA经反向转录（见中心法则）合成相应的互补 DNA(cDNA),再加入用32P标记的核苷三磷酸,用DNA多聚酶I切口移位方法制成有同位素标记的探针.把探针 DNA和硝酸纤维滤膜上的菌落或噬菌体分别进行变性处理,然后进行分子杂交.再将 X光底片覆盖在经过处理的滤膜上以进行放射自显影.在培养皿上找出和 X光底片上的黑点相对应的菌落或噬菌斑,这些菌落或噬菌体中便包含着所需要的基因.经过扩增便能得到大量的细菌或噬菌体,从中可以分离出所需基因的DNA片段.
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