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细菌DNA提取过程中各部药品的作用1.TE 2.SDS、蛋白酶K,37°C,1h 3.NaCl4.CTAB/NaCl,65°C,20min5.酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)6.氯仿:异戊醇7.异丙醇8.70%乙醇9.TE
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细菌DNA提取过程中各部药品的作用
1.TE
2.SDS、蛋白酶K,37°C,1h
3.NaCl
4.CTAB/NaCl,65°C,20min
5.酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)
6.氯仿:异戊醇
7.异丙醇
8.70%乙醇
9.TE
1.TE
2.SDS、蛋白酶K,37°C,1h
3.NaCl
4.CTAB/NaCl,65°C,20min
5.酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)
6.氯仿:异戊醇
7.异丙醇
8.70%乙醇
9.TE
▼优质解答
答案和解析
其实提取细菌基因组DNA并不是要用到上面提到的所有试剂.
TE是用来浮起细菌的.如果是阳性菌的话最好是用溶菌酶处理一下.
SDS可以让细胞裂解,并与核蛋白结合(当然也包括DNA).蛋白酶K自然是降解蛋白的.到这一步可以直接用异丙醇沉淀,70%乙醇洗一次(洗去少量的盐分).凉得差不多再用少量TE溶解就得到DNA了.
当然,在蛋白酶K处理过后,也可以用1.4M NaCl沉淀一下蛋白(DNA在此浓度溶解度增加,而蛋白减小).或者用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白.其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗.
CTAB/NaCl功能与SDS相当,但一般用于提取植物基因组.
TE是用来浮起细菌的.如果是阳性菌的话最好是用溶菌酶处理一下.
SDS可以让细胞裂解,并与核蛋白结合(当然也包括DNA).蛋白酶K自然是降解蛋白的.到这一步可以直接用异丙醇沉淀,70%乙醇洗一次(洗去少量的盐分).凉得差不多再用少量TE溶解就得到DNA了.
当然,在蛋白酶K处理过后,也可以用1.4M NaCl沉淀一下蛋白(DNA在此浓度溶解度增加,而蛋白减小).或者用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白.其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗.
CTAB/NaCl功能与SDS相当,但一般用于提取植物基因组.
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