小立碗藓是一种苔藓植物，易培养，被广泛应用于生物学实验研究，又因其同源重组的效率很高，已成为研究基因功能的良好材料．请回答下列问题：（1）甲同学在使用高倍镜观察小立碗

Question

小立碗藓是一种苔藓植物，易培养，被广泛应用于生物学实验研究，又因其同源重组的效率很高，已成为研究基因功能的良好材料．请回答下列问题：

（1）甲同学在使用高倍镜观察小立碗藓的叶绿体时，发现在适宜条件下细胞中的叶绿体长时间静止不动，最可能的原因是___．
（2）乙同学用小立碗藓进行了如下实验操作：
步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，放置一片小立碗藓的小叶，盖上盖玻片．
步骤二：从盖玻片一侧滴入0.3g/mL的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧___，这样重复几次．
步骤三：在显微镜下观察，若发现叶绿体向细胞中间聚拢，说明___．
（3）同源重组在细胞中可自然发生，交叉互换的位点必须发生在特定的同源序列中，原理如图1所示．已知由硫酸盐降解酶（K基因编码）催化某种硫酸盐（APS）的降解是高等植物中硫酸盐利用的关键步骤．有人提出，植物体中还存在着该硫酸盐降解的支路（PAPS），但不能确定其相关酶是否在植物体中存在．科研人员利用小立碗藓进行了以下研究：
①测定K基因两侧的碱基序列．若测得在序列“5′…CGACCCGGGAGT…3′”中含有一个6个碱基对的限制酶SmaⅠ的识别序列，可推知该酶的识别序列为___．
②质粒pcDNA3上有Neo基因（新霉素抗性基因）和限制酶SmaⅠ、TthⅢ和BsmⅠ的酶切位点，如图2所示．为了使Neo基因能与K基因发生同源重组，应选用限制酶___将Neo基因从质粒上切下来，然后在该基因的两侧增加与K基因两侧相同的___，构建具有Neo基因的表达载体．
③制备小立碗藓的原生质体，将其放在___溶液中，利用聚乙二醇介导直接将Neo基因表达载体导入小立碗藓细胞内．
④在添加了___的培养基中培养上述小立碗藓细胞，若能够发育成完整的植物体，则表明该植株已没有K基因．若通过此转化途径得到的植株___，说明在小立碗藓中存在PAPS支路．

Answer 1

（1）活细胞中叶绿体会随细胞质流动而运动，若发现在适宜条件下细胞中的叶绿体长时间静止不动，最可能的原因是 细胞已死亡．（2）乙同学用小立碗藓进行了如下实验操作：步骤一：制片观察，在洁净的载玻片中央加一滴...