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如图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制
题目详情
如图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离,1Kb=1000个碱基对长度.请据图回答:
(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是______、______.
(2)将图中的目的基因与质粒B进行重组,需要用到______酶.如果是两两重组,可能有______种长度的重组结果.
(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤.现运用______酶切质粒,完全酶切后进行电泳观察,若出现长度为1.1kb和______kb,或者______kb和______kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计).
(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是______、______.
(2)将图中的目的基因与质粒B进行重组,需要用到______酶.如果是两两重组,可能有______种长度的重组结果.
(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤.现运用______酶切质粒,完全酶切后进行电泳观察,若出现长度为1.1kb和______kb,或者______kb和______kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计).
▼优质解答
答案和解析
(1)由图可知,质粒A中缺少标记基因,质粒B中的复制原点被酶切割,所以A、C不能作为运载体.(2)由图可知,获取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ,所以切割质粒B也用该限制酶,同时目的基因与运载体连接的时候还需要DN...
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