如图为叶绿体结构模式图，它是进行光合作用的细胞器．光合作用光反应所需的PSⅠ、PSⅡ、Cytb6/f、ATP酶四类蛋白复合体存在图中③，同化C02的全部酶类则存在图中④，为了证实C02同化场所

Question

如图为叶绿体结构模式图，它是进行光合作用的细胞器．光合作用光反应所需的PSⅠ、PSⅡ、Cytb6/f、ATP酶四类蛋白复合体存在图中③，同化C0₂的全部酶类则存在图中④，为了证实C0₂同化场所在哪里，某实验小组设计了下列实验，请你协助完成“验证C0₂同化场所是在叶绿体的基质而不是在叶绿体的类囊体的膜上”的实验．
（1）设计思路：
首先要提取出完整的叶绿体，然后把______分开，分别检测暗反应活性．
注：暗反应活性是指有无光合产物的生成或有无反应的条件（如酶）．
（2）实验步骤：
①在适宜的条件下，提取具有生理活性的完整叶绿体．
②将提取的完整叶绿体放入______中，然后高速离心，分离得到上清液和沉淀物．
③采用以下测定可判别C0₂同化场所：分别在上清液和沉淀物中加入______，检测有无含有14C的光合产物的生成．也可将步骤②获得的上清液和沉淀物进行电泳，检测两者是否含有______．
（3）预期实验结果并得出结论：
如果在上清液中检测到暗反应活性，而沉淀物中检测不到暗反应活性，证实______．

Answer 1

（1）本实验的目的是“验证C0₂同场所是在叶绿体的基质而不是在叶绿体的类囊体的膜上”，所以要将光反应的场所类囊体薄膜和暗反应的场所叶绿体基质分开．
（2）②分离的方法是用差速离心法，所以在使用差速离心法之前，要先用渗透作用的原理使得叶绿体的内膜和外膜破裂，让类囊体薄膜和叶绿体基质分开．
③测定有2种方法，一是在类囊体薄膜和叶绿体基质中测定同化C0₂的酶类；另一种方法是用放射性的碳元素标记二氧化碳以后，测定光合作用的产物出现在哪里．（3）本实验是验证性的实验结论是唯一的，“C0₂同化场所是在叶绿体的基质而不是在叶绿体的类囊体的膜上”．
故答案为：
（1 ）叶绿体的基质和叶绿体的类囊体的膜
（2）②蒸馏水（清水或低渗）    ③NaH¹⁴C0₃溶液（¹⁴C0₂）       同化C0₂的酶类
（3 ） C0₂同化场所是在叶绿体的基质而不是在叶绿体的类囊体的膜上