如图是通过胚胎工程培育试管牛的过程．据图回答相关问题：（1）人工授精时卵子要发育到期才能与精子结合，受精的标志是；从良种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用，其获

Question

如图是通过胚胎工程培育试管牛的过程．据图回答相关问题：

（1）人工授精时卵子要发育到___期才能与精子结合，受精的标志是___；从良种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用，其获能的方法有培养法和___法．
（2）为了获得更多的早期胚胎，常用___激素对供体进行处理
（3）在牛体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的___．此时，瓶壁上形成的细胞层数是___．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用___酶处理．
（4）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的氧气以维持细胞呼吸外，还需要提供二氧化碳气体以维持___，图中过程A称为___．
（5）如暂时不进行A过程，通常在___条件下保存早期胚胎．

Answer 1

（1）人工授精时卵子要发育到减数第二次分裂中期才能与精子结合；受精的标志是 在卵细胞膜和透明带间出现两个极体；从良种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用，其获能的方法有培养法和化学（诱导）法．
（2）为了获得更多的早期胚胎，常用促性腺激素对供体进行处理．
（3）动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．此时，瓶壁上只能形成单层细胞．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理．
（4）动物细胞培养时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供CO₂，以维持培养液的pH．由以上分析可知，图中过程A为胚胎移植．
（5）通常在冷冻（或超低温、液氮、零下196℃）条件下保存早期胚胎．
故答案为：
（1）减数第二次分裂中期     在卵细胞膜和透明带间出现两个极体   化学（诱导）
（2）促性腺
（3）接触抑制    单层（或一层）    胰蛋白（或胶原蛋白）  
（4）（培养液/基的）pH       胚胎移植
（5）冷冻（或超低温、液氮、零下196℃）