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回答下列有关遗传信息传递与表达的问题.为制备目的基因Y(图1)与质粒X(图2)的重组DNA,将质粒X与含Y的DNA片段加入含有限制性核酸内切酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的反应混合物中,酶切后的片段
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回答下列有关遗传信息传递与表达的问题.
为制备目的基因Y(图1)与质粒X(图2)的重组DNA,将质粒X与含Y的DNA片段加入含有限制性核酸内切酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的反应混合物中,酶切后的片段再加入含有连接酶的反应体系中.其中,质粒X含有leu2基因,可用于合成亮氨酸,目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR
(1)根据图3分别写出BgⅠⅡ与BamHⅠ酶切后形成的末端序列:___、___.
(2)BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y能够连接的原因是___.
将连接后的产物转化入一种Z细菌,Z细菌对卡那霉素敏感,且不能在缺乏亮氨酸的培养基中培养.
(3)使用BgⅠⅡ处理重组质粒,可以得到___.
A.长度为3300bp的环状DNA
B.长度为3300bp的线形DNA
C.长度为2800bp和500bp的线形DNA
D.长度为2800bp的环状DNA
(4)要筛选含有重组质粒的Z细胞,应选择___.
A.卡那霉素和亮氨酸均含的培养基
B.卡那霉素和亮氨酸均不含的培养基
C.含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基
D.含亮氨酸但不含卡那霉素的培养基.
为制备目的基因Y(图1)与质粒X(图2)的重组DNA,将质粒X与含Y的DNA片段加入含有限制性核酸内切酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的反应混合物中,酶切后的片段再加入含有连接酶的反应体系中.其中,质粒X含有leu2基因,可用于合成亮氨酸,目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR
(1)根据图3分别写出BgⅠⅡ与BamHⅠ酶切后形成的末端序列:___、___.
(2)BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y能够连接的原因是___.
将连接后的产物转化入一种Z细菌,Z细菌对卡那霉素敏感,且不能在缺乏亮氨酸的培养基中培养.
(3)使用BgⅠⅡ处理重组质粒,可以得到___.
A.长度为3300bp的环状DNA
B.长度为3300bp的线形DNA
C.长度为2800bp和500bp的线形DNA
D.长度为2800bp的环状DNA
(4)要筛选含有重组质粒的Z细胞,应选择___.
A.卡那霉素和亮氨酸均含的培养基
B.卡那霉素和亮氨酸均不含的培养基
C.含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基
D.含亮氨酸但不含卡那霉素的培养基.
▼优质解答
答案和解析
(1)限制酶BgⅠⅡ与BamHⅠ的识别序列及切割位点如图:,因此它们切割形成的末端序列依次为:、.
(2)BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y具有相同的黏性末端,根据碱基互补配对原则,它们能够连接形成重组DNA.
(3)BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因形成的重组DNA分子上没有BgⅠⅡ酶的识别序列,因此使用BgⅠⅡ处理重组质粒,可以得到长度为3300bp的环状DNA.
(4)由于质粒X含有leu2基因,可用于合成亮氨酸,目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR,因此要筛选含有重组质粒的Z细胞,应选择含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基.
故答案为:
(1)
(2)酶切后产生相同的黏性末端,并遵循碱基互补配对原则
(3)A
(4)C
(2)BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y具有相同的黏性末端,根据碱基互补配对原则,它们能够连接形成重组DNA.
(3)BgⅠⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因形成的重组DNA分子上没有BgⅠⅡ酶的识别序列,因此使用BgⅠⅡ处理重组质粒,可以得到长度为3300bp的环状DNA.
(4)由于质粒X含有leu2基因,可用于合成亮氨酸,目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR,因此要筛选含有重组质粒的Z细胞,应选择含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基.
故答案为:
(1)
(2)酶切后产生相同的黏性末端,并遵循碱基互补配对原则
(3)A
(4)C
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