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两种刚果红染色法的问题.两种刚果红染色法的比较刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史,在本课题中我们给出了两种方法.方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚
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两种刚果红染色法的问题
.两种刚果红染色法的比较 刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史,在本课题中我们给出了两种方法.方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;其优点是这样显示出的颜色反应基本上纤维素分解菌的作用.方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂的问题,缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应.但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊,因为培养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分.方法二的另一缺点是:有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分.两种方法之前,菌株都有先经过选择培养基的培养吗?两种方法都有用鉴别培养基吗?如果有,那方法二会出现假阳性反应(鉴别培养基含土豆汁),方法一为什么就不会呢?
既然方法二会产生假阳性反应,为什么还要在鉴别培养基里加上土豆汁?不加土豆汁的话,假阳性反应的程度不是会轻些吗?请再具体说说什么事假阳性反应.
.两种刚果红染色法的比较 刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史,在本课题中我们给出了两种方法.方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;其优点是这样显示出的颜色反应基本上纤维素分解菌的作用.方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂的问题,缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应.但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊,因为培养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分.方法二的另一缺点是:有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分.两种方法之前,菌株都有先经过选择培养基的培养吗?两种方法都有用鉴别培养基吗?如果有,那方法二会出现假阳性反应(鉴别培养基含土豆汁),方法一为什么就不会呢?
既然方法二会产生假阳性反应,为什么还要在鉴别培养基里加上土豆汁?不加土豆汁的话,假阳性反应的程度不是会轻些吗?请再具体说说什么事假阳性反应.
▼优质解答
答案和解析
1、加入氯化钠溶液的作用是洗去未结合或者结合不牢的刚果红染液,使透明圈更清晰.没啥可具体的了.
2、鉴别培养基加土豆汁是为了细菌更好的生长.因为土豆汁是比纤维素更好的碳源(你可以理解为更好吃的食物),有土豆淀粉的情况下细菌可以更好的生长和繁殖,只有细菌繁殖到一定数量才能进行下面的鉴定操作,所以土豆汁是必须加的.
3、假阳性反应就是假的阳性反应.我们认为,刚果红染色后,我们需要的菌会表现出阳性反应(即透明圈).但方法二有可能出现不是我们要的菌,但也出现了透明圈,所以被误认为我们要的菌,这就是假阳性反应.
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其实方法一是后染色,方法二是先染色.先染色就导致染液在培养基中的时间较长,虽然刚果红是只染纤维素,淀粉等的分解产物虽不影响纤维素,但会冲淡染色反应,出现模糊透明圈(即假阳性).另外还有色素分解的问题.如果是后染(方法一),之前没有染液存在,就没有冲淡的问题了,就没有假阳性了.
2、鉴别培养基加土豆汁是为了细菌更好的生长.因为土豆汁是比纤维素更好的碳源(你可以理解为更好吃的食物),有土豆淀粉的情况下细菌可以更好的生长和繁殖,只有细菌繁殖到一定数量才能进行下面的鉴定操作,所以土豆汁是必须加的.
3、假阳性反应就是假的阳性反应.我们认为,刚果红染色后,我们需要的菌会表现出阳性反应(即透明圈).但方法二有可能出现不是我们要的菌,但也出现了透明圈,所以被误认为我们要的菌,这就是假阳性反应.
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其实方法一是后染色,方法二是先染色.先染色就导致染液在培养基中的时间较长,虽然刚果红是只染纤维素,淀粉等的分解产物虽不影响纤维素,但会冲淡染色反应,出现模糊透明圈(即假阳性).另外还有色素分解的问题.如果是后染(方法一),之前没有染液存在,就没有冲淡的问题了,就没有假阳性了.
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