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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHHH基因在角化囊肿中的表达情况.其基本流程如图:(Amp表示氨苄
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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHHH基因在角化囊肿中的表达情况.其基本流程如图:(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)
请回答:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,______(需要/不需要)启动子.
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为______细胞,然后导入重组载体.实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这此细菌不含有______基因.
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别.根据上述原理可以初步判断______(蓝色/白色)菌落中的大肠杆菌为重组菌.
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况.______.
请回答:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,______(需要/不需要)启动子.
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为______细胞,然后导入重组载体.实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这此细菌不含有______基因.
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别.根据上述原理可以初步判断______(蓝色/白色)菌落中的大肠杆菌为重组菌.
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况.______.
▼优质解答
答案和解析
解析:(1)由图可知,SHH基因插入在LacZ基因,LacZ基因被SHH基因插入后不表达,所以要使SHH基因表达就需要启动子.
(2)大肠杆菌细胞用Ca2+处理后就成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞;要在添加氨苄青霉素的培养基上生存,一定要含有抗氨苄青霉素基因才可以,没有抗氨苄青霉素基因将会死亡.
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达,在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成白色菌落.
(4)判断SHH基因的转录情况,也就是判断SHH基因是否转录出mRNA.
故答案为:
(1)需要
(2)感受态 Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性)
(3)白色
(4)SHH转录的mRNA
(2)大肠杆菌细胞用Ca2+处理后就成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞;要在添加氨苄青霉素的培养基上生存,一定要含有抗氨苄青霉素基因才可以,没有抗氨苄青霉素基因将会死亡.
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达,在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成白色菌落.
(4)判断SHH基因的转录情况,也就是判断SHH基因是否转录出mRNA.
故答案为:
(1)需要
(2)感受态 Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性)
(3)白色
(4)SHH转录的mRNA
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