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PCR引物设计问题我是要扩增一个片段,加上双酶切位点,片段就那么大,我就需要那么大加酶切位点?这引物怎么设计?是不是只要5‘端序列,以及3’端的反向互补序列加上酶切位点和保护碱基就
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PCR引物设计问题
我是要扩增一个片段,加上双酶切位点,片段就那么大,我就需要那么大加酶切位点?这引物怎么设计?是不是只要5‘端序列,以及3’端的反向互补序列加上酶切位点和保护碱基就好了?为什么网上设计引物动不动就用软件?
我是要扩增一个片段,加上双酶切位点,片段就那么大,我就需要那么大加酶切位点?这引物怎么设计?是不是只要5‘端序列,以及3’端的反向互补序列加上酶切位点和保护碱基就好了?为什么网上设计引物动不动就用软件?
▼优质解答
答案和解析
设计的方法跟你说的差不多,之所以使用软件,是可以同果软件计算你一对引物的Tm值,GC含量,以及两个引物之间是否会形成二聚体,这样你就可以通过分析结果来调整你两条引物的长度使上下游的引物扩增效率更高
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