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PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插(包含一定共同片段),这样成吗.

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PCR 引物设计,
在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插(包含一定共同片段),这样成吗.
▼优质解答
答案和解析
当然可以咯,不过我没明白为什么上游引物GC rich跟分两段扩增有什么关系,1.2K一次扩增是完全没有问题的,如果上游引物出现GC rich的情况,那么可以考虑在更加上游的地方设计引物啊,在这个基因外测的参考序列上设计引物就ok咯
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