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为什么会出现测序无反应信号,最好能把可能的原因列举一下,
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为什么会出现测序无反应信号,最好能把可能的原因列举一下,
▼优质解答
答案和解析
如果是光秃秃的一点信号都没有:
1.引物有问题
2.样品中EDTA的浓度过高,抑制了酶反应.(这个问题很常见,因为elute buffer大多含有EDTA.建议换用ph8 的 Tris,EDTA free)
3.除了EDTA外,elute buffer 中的其他盐离子.这个一般不会完全打断反应,结果往往是测序信号突然中断,或者衰减很快.
4.样本浓度太低,结果和3类似.
1.引物有问题
2.样品中EDTA的浓度过高,抑制了酶反应.(这个问题很常见,因为elute buffer大多含有EDTA.建议换用ph8 的 Tris,EDTA free)
3.除了EDTA外,elute buffer 中的其他盐离子.这个一般不会完全打断反应,结果往往是测序信号突然中断,或者衰减很快.
4.样本浓度太低,结果和3类似.
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