我想问问关于斑马鱼转基因的一般试验方法.我是对转基因没有一点儿基础的人.倒是让我对斑马鱼的大脑进行转基因.别人说好像要先找到斑马鱼的全序列.我是一点儿头绪都没有.

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我想问问关于斑马鱼转基因的一般试验方法.我是对转基因没有一点儿基础的人.
倒是让我对斑马鱼的大脑进行转基因.别人说好像要先找到斑马鱼的全序列.我是一点儿头绪都没有.

▼优质解答

答案和解析

序列到NCBI上去查,物种选Zebrafish或Danio rerio.
将目的基因与质粒载体构建重组质粒,最好再接个报告基因,比如EGFP.
和I-SceI（大范围核酸转移酶）一起共显微注射到单细胞期阶段斑马鱼胚胎中（产后30分钟）,溶液配方
质粒 0.5-1µl
I-SceI Buffer(10×) 1µl
I-SceI enzyme(5u/µl) 1µl
dd H20 补足10µl
质粒终浓度 50-100ng/µl,注射量2nl/per.

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