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分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8
题目详情
分离与鉴定蛋白质
已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8.3,如何分离和鉴别该植物叶绿体蛋白A?
已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,其等电点为6.8-6.9,植物叶绿体内存在另一蛋白B分子量为73KD,具有四个相同的亚基,等电点为8.2-8.3,如何分离和鉴别该植物叶绿体蛋白A?
▼优质解答
答案和解析
1.破碎细胞(简单 自己查资料)
2.提取纯化叶绿体(简单 自己查资料)
3.用pH 8.25 缓冲液 破碎叶绿体
4.离心去除沉淀(沉淀含有蛋白B)收集上清液(含有蛋白A)
5.缓慢调解上清液pH 到6.8-6.9,离心 收集沉淀(含有蛋白A)
6.用pH 到6.8-6.9的缓冲液洗涤沉淀.离心收集沉淀.
7.最后溶解于pH 7.6-7.8 的 比如pBS 中
8.鉴定 SDS-PAGE (加2mer 等还原剂),电泳 观察条带数目和分子量
2.提取纯化叶绿体(简单 自己查资料)
3.用pH 8.25 缓冲液 破碎叶绿体
4.离心去除沉淀(沉淀含有蛋白B)收集上清液(含有蛋白A)
5.缓慢调解上清液pH 到6.8-6.9,离心 收集沉淀(含有蛋白A)
6.用pH 到6.8-6.9的缓冲液洗涤沉淀.离心收集沉淀.
7.最后溶解于pH 7.6-7.8 的 比如pBS 中
8.鉴定 SDS-PAGE (加2mer 等还原剂),电泳 观察条带数目和分子量
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