酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用．请回答下列问题：（1）酵母菌广泛分布在自然界中，若要得到纯化的酵母菌菌种，常采用的分离方法有．分

Question

酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用．请回答下列问题：

（1）酵母菌广泛分布在自然界中，若要得到纯化的酵母菌菌种，常采用的分离方法有___．分离出的菌种在酿制果酒的过程中，早期是酵母菌进行繁殖的阶段，其细胞增殖所需要的能量主要来源于___（填细胞结构）．
（2）酿酒酵母的生活史中有两种形态：单倍体和二倍体，如图是酵母菌单倍体和二倍体的形态相互交替的过程（酿酒酵母的生活史），若图中甲的基因型为Dd，则乙、丙的基因型分别是___；图中②④过程所示的出芽繁殖类似于有丝分裂，正在出芽生殖的酵母细胞中有无“同源染色体”___（填“一定有”“不一定有”或“一定没有”）．
（3）为及时了解酵母菌种群密度变化，某时刻取出酵母培养液稀释100倍后，分别滴加0.1mL到三个相同的固体培养基上，置于温度为___℃的适宜条件下培养一段时间后进行菌落计数，三个培养基上菌落数分别为41、52、57，此时酵母菌的种群密度是___个/L．
（4）酵母菌也常用作基因工程中的受体细胞，重组细胞的筛选过程所需培养基在接种前一般需要经过___灭菌，若选用二倍体的酵母细胞作为基因工程的受体细胞，目的基因只插入到酵母菌的一条染色体上，该酵母产生的子囊孢子萌发形成的单倍体酵母中含目的基因的比例是___．

Answer 1

（1）纯化酵母菌菌种，常采用的分离方法有稀释涂布法或平板划线法．在果酒发酵过程中，早期酵母菌进行有氧呼吸为细胞代谢通过能量，其细胞增殖所需要的能量主要来源于线粒体．
（2）据图分析，乙为甲经出芽生殖形成的二倍体，期基因型为Dd，丙为乙减数分裂形成的单倍体，所以其基因型为D或d．正在出芽生殖的酵母细胞既可以是单倍体，也可以是二倍体，所以不一定有同源染色体．
（3）酵母菌的最适生长温度为18～25℃．酵母菌的种群密度为：（41+52+57）×100÷0.1×1000=5×10⁷个/L．
（4）重组细胞的筛选过程所需培养基在接种前一般需要经过高压蒸汽灭菌．目的基因只插入到酵母菌的一条染色体上，该酵母产生的子囊孢子是通过减数分裂形成的，所以子囊孢子萌发形成的单倍体酵母中含目的基因的比例是(1)/(2)（50%）．
故答案为：
（1）稀释涂布法或平板划线法　线粒体　
（2）Dd、D或d　不一定有
（3）18～25　5×10⁷　
（4）高压蒸汽（或“湿热”）　    (1)/(2)（50%）