苹果园广泛使用的一种除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂

Question

苹果园广泛使用的一种除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，再稀释10³倍．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为___．
（2）科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌，所用培养基应该___．
（3）接种技术的核心是___．在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步___，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是___或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是___，有透明带菌落利用的氮源主要是___，据此可筛选出目的菌．实验结果如乙图显示的A～E五种菌株中，___是最理想菌株．

Answer 1

（1）图中稀释的倍数是10⁸，三个菌落的平均数=（55+56+57）÷3=56，则每毫升样品中菌株数=56÷1×10⁸=5.6×10⁹个，所以每升土壤浸出液中的菌株数=5.6×10⁹×10³=5.6×10¹²个．
（2）该除草剂为含氮有机物，为了选育能降解该除草剂的细菌，应采用唯一氮源的选择培养基，即无氮的固体培养基中添加该除草剂．
（3）接种技术的核心是无菌操作，防止杂菌污染，保证培养物的纯度．在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长，原因是培养基缺少这些细菌可利用的氮源．
（4）由于该除草剂的培养基不透明，被菌落分解后可产生透明带，无透明带说明除草剂未被分解，菌落利用的氮源就只能是空气中的氮气了；而出现透明带说明除草剂被分解，菌落是分解该除草剂的细菌，氮源是该除草剂；E透明圈最大，故是最理想菌株．
故答案为：
（1）5.6×10¹²
（2）在无氮培养基添加了该除草剂
（3）防止杂菌污染，保证培养物的纯度      稀释获得单个菌落        培养基中缺少这些细菌可利用的氮源
（4）氮气该除草剂   E