（2013•安徽一模）西北农业大学的科学家们将抗烟草花叶病毒的基因与土壤农杆菌的质粒进行重组．下图表示构建重组质粒和筛选含抗烟草花叶病毒基因的土壤农杆菌的过程请据图回答：（

Question

（2013•安徽一模）西北农业大学的科学家们将抗烟草花叶病毒的基因与土壤农杆菌的质粒进行重组．下图表示构建重组质粒和筛选含抗烟草花叶病毒基因的土壤农杆菌的过程请据图回答：

（1）构建重组质粒需要______酶，为了促进重组质粒导入土壤农杆菌的过程，常用
______处理土壤农杆菌．
（2）分析图中B、C两个培养基上的菌落存活情况，含抗烟草花叶病毒基因的菌落位于（选填“B”或“C”）______上．
（3）将含有重组质粒的土壤农杆菌．转人烟草的叶肉细胞后，通过植物组织培养技术培养成抗烟草花叶病毒的烟草植株，为检测转基因烟草是否抗烟草花叶病毒，可采用______的方法检测烟草体内是否含烟草花叶病毒的蛋白质．若含有，则转基因烟草不抗烟草花叶病；若不含有，则转基因烟草抗烟草花叶病．

Answer 1

（1）构建重组质粒时，首先需要限制酶切割质粒和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒；将目的基因导入微生物细胞时，需要用CaCl₂处理微生物细胞，使之处于能吸收周围环境中DNA分子的感受态，以便目的基因的导入．
（2）由图可知，含有重组质粒的农杆菌能在含氯霉素的培养基上生存下来，但不能在含卡那霉素的培养基上生存下来，即含抗烟草花叶病毒基因的菌落位于C上．
（3）要检测烟草体内是否含烟草花叶病毒的蛋白质，可采用抗原抗体杂交法．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶     CaCl₂
（2）C
（3）抗原抗体杂交