微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能讲解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过项油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养

Question

微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能讲解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过项油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请分析回答：
（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自___的土壤．
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用___培养基，常用的接种方法是___或
___．
（3）接种后，必须密封培养，其原因是该类微生物的异化作用类型是___．培养一段时间后，在培养基上形成降油圈，此时选取降油圈___的菌落作为高效菌株．
（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220，则样品中微生物的数量为___个/mL．该统计结果___（低于/高于）实际值．

Answer 1

（1）在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集．
（2）从功能上，应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）该类微生物是厌氧微生物，接种后应密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈，降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株．
（4）计算微生物的数量应取三个平板的平均值，即（200+180+220）÷0.2=100个/mL．该结果会低于实际值，因为看到的是菌落数目．
故答案为：
（1）长期被石油污染（含石油多的）
（2）选择   平板划线法   稀释涂布平板法
（3）厌氧型   最大
（4）1000  低于