（2011•江苏二模）在基因工程中筛选含有目的基因的重组体常用标志补救法．该方法是用pUC18质粒作为运载体（含编码β半乳糖苷酶α片段的序列），突变型的大肠杆菌（E•coli）（含编码β

Question

（2011•江苏二模）在基因工程中筛选含有目的基因的重组体常用标志补救法．该方法是用pUC18质粒作为运载体（含编码β半乳糖苷酶α片段的序列），突变型的大肠杆菌（E•coli）（含编码β半乳糖苷酶ω片段的序列）作为受体，它们的表达产物营养缺陷互补，有β半乳糖苷酶的活性，能与特异性物质结合生成蓝色化合物（见第一组），这样就可以利用营养突变菌株进行筛选重组体．单独存在的α和ω片段均无β半乳糖苷酶的活性，不能与特异性物质结合生成蓝色化合物．根据图请分析回答有关问题：

（1）在构建重组体pUC18过程中，它的组成除了目的基因外，还必须有启动子、______以及______，图中表示目的基因是______（填字母）．
（2）重组体pUC18构建的目的是______．
（3）将重组体pUC18导入突变型的大肠杆菌（E•coli）常用______法，早期的基因工程都用原核细胞作为受体细胞的原因是______．
（4）白色菌落出现的原因有______．

Answer 1

（1）构建的重组体pUC18包括目的基因外，还有启动子，终止子、标记基因，比较质粒与重组质粒可知，C基因插入质粒中，所以目的基因是C．
（2）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．
（3）目的基因导入微生物需要用Ca²⁺处理，使其成为感受态细胞；原核细胞具有繁殖快，代谢旺盛，基因表达产物易分离，常用来作为基因工程的受体细胞．
（4）根据题意，单独存在的α和ω片段均无β半乳糖苷酶的活性，不能与特异性物质结合生成蓝色化合物，故出现白色的原因是编码α片段的序列被破坏，不能合成α片段或未导入pUC18质粒，不含编码α片段的序列，不能合成α片段
故答案为：
（1）终止子   标记基因    C
（2）使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用
（3）感受态转化法   繁殖快，代谢旺盛，基因表达产物易分离
（4）编码α片段的序列被破坏，不能合成α片段；未导入pUC18质粒，不含编码α片段的序列，不能合成α片段