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下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多.将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行
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下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多.将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养.在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖.用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离.材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90mL无菌水的锥形瓶、恒温箱.
(1)方法步骤:
①倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在___旁操作.
②制备土壤稀释液:取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀.用无菌吸管吸取上清液1mL,转至盛有9mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度.
③涂布:按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布___ 个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布___个.
④培养:放入恒温箱内,在28℃~30℃下培养3d~4d.
⑤细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取菌落数在___的平板进行计数.如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌株数是___.(稀释度是105)
(2)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数___ (选填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目.原因是___.
(3)制备牛肉膏蛋白胨培养基的操作过程是:___.
(1)方法步骤:
①倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在___旁操作.
②制备土壤稀释液:取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀.用无菌吸管吸取上清液1mL,转至盛有9mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度.
③涂布:按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布___ 个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布___个.
④培养:放入恒温箱内,在28℃~30℃下培养3d~4d.
⑤细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取菌落数在___的平板进行计数.如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌株数是___.(稀释度是105)
(2)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数___ (选填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目.原因是___.
(3)制备牛肉膏蛋白胨培养基的操作过程是:___.
▼优质解答
答案和解析
(1)①在酒精灯火焰旁倒平板,可以减少杂菌污染.③为了避免实验误差,保证结果准确,一般设置3~5个平板,空白对照组需要牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个.⑤选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值.如果测定...
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