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(2014•红桥区二模)逆转录病毒载体是一种表达型质粒,结构如图所示.如图的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上,不断地表达其携带的目的基因,获得大量重组逆转录病

题目详情
(2014•红桥区二模)逆转录病毒载体是一种表达型质粒,结构如图所示.如图的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上,不断地表达其携带的目的基因,获得大量重组逆转录病毒.(E、F、H分别为限制酶 E、F、H的酶切位点).
(1)逆转录的模板是______,原料是______.
(2)在构建重组质粒时,目的基因插入该质粒,此过程需要的酶是限制酶______和______
(3)将重组质粒转人大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为______才能完成转化过程.为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加______的培养基进行培养.
(4)获取大量重组质粒后,可培育转基因小鼠,将重组质粒导入小鼠受精卵的方法是______.若目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上,那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______.
▼优质解答
答案和解析
(1)逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,需要以四种脱氧核苷酸为原料.
(2)根据题干信息“逆转录病毒序列可以整合到动物细胞的染色体上,不断地表达其携带的目的基因”可知,在构建重组质粒时,应将目的基因插入该质粒的逆转录病毒序列中,因此该过程应选用限制酶F切割质粒和含有目的基因的外源DNA分子,此外还需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子.
(3)将目的基因导入微生物细胞时,需用Ca2+(或CaCl2)处理微生物细胞使之成为感受态细胞(易吸收周围环境中的DNA分子)才能完成转化过程.标记基因是抗生素A抗性基因,因此可用含有抗生素A的培养基筛选含有重组质粒的大肠杆菌.
(4)显微注射法将目的基因导入动物细胞最有效的方法.若目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上,则转基因动物可被看成杂合子,要想获得转基因纯合子小鼠,可让转基因小鼠间相互交配(或杂交).
故答案为:
(1)RNA   (四种)脱氧核苷酸
(2)F    DNA连接酶
(3)感受态细胞   抗生素A   
(4)显微注射法   转基因小鼠间相互交配(或杂交)