家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．（1）进行转基因操作前，需用酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．（

Question

家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用___酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的___和___之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的分子检测方法有___、___．
（3）通过PCR技术可大量获取目的基因．PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、___和___．
（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以___，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的___原理．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的___原理．

Answer 1

（1）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶处理动物组织，以便获得单个细胞．
（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端．基因表达包括转录和翻译两个步骤，要检测目的基因是否转录，可采用分子杂交技术，要检测目的基因是否翻译，可采用抗原-抗体杂交法．
（3）通过PCR技术可大量获取目的基因，PCR反应体系的主要包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、与干扰素基因特异性配对的DNA引物和TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）．
（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的物质循环再生原理．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的整体性原理．
故答案为：
（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）
（2）启动子    终止子   mRNA分子杂交技术
抗原-抗体杂交技术
（3）TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）
与干扰素基因特异性配对的DNA引物  
（4）增大细胞贴壁生长的附着面积
（5）物质循环再生      整体性