（2011•静安区一模）（四）生物技术广泛应用于医疗、农业、工业等领域．下列是与生物工程类相关的问题：Ⅰ．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化

Question

（2011•静安区一模）（四）生物技术广泛应用于医疗、农业、工业等领域．下列是与生物工程类相关的问题：
Ⅰ．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）．

（1）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供______，培养基灭菌采用的最适方法是______法．
（2）可利用______技术使脂肪酶能够重复使用．
（3）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的______技术．
Ⅱ．生长激素在治疗激素分泌过少的矮小症方面有积极的作用．为了批量生产生长激素，可以采取转基因技术将控制生长激素合成的基因转移到微生物细胞内．
下列是涉及此转基因技术的几种限制酶识别序列及其割位点；图1、图2中箭头表示相关限制酶对质粒和供体DNA的切割位点：

请回答下列问题：
（1）四种酶切位点相比较，Sma I酶切位点结构最稳定，原因是______
（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用Sma I切割，原因是______．
（3）与只是用EcoR I 相比较，使用BamH I和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、目的基因的优点在于可以防止______．
（4）为了检测基因转导的成功，需要在培养微生物的培养基中加入______，若微生物能正常生长，说明转导成功．

Answer 1

Ⅰ（1）植物油属于脂肪中的一种，其元素组成只有CHO，因此筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源．培养基灭菌采用的最适方法是高压、高温、蒸汽灭菌法．（2）可利用固定化酶技术使...