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哺乳动物的红细胞在清水中会很快膨胀破裂,而爪蟾的卵母细胞在清水中不会发生这种变化,科学家从哺乳动物的细胞膜上分离到一种分子量在28kD的膜蛋白,初步判断这种蛋白质可能提供了

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哺乳动物的红细胞在清水中会很快膨胀破裂,而爪蟾的卵母细胞在清水中不会发生这种变化,科学家从哺乳动物的细胞膜上分离到一种分子量在28kD的膜蛋白,初步判断这种蛋白质可能提供了水分子的顺浓度跨膜运输的通道,称为水通道蛋白.为了探究其功能,科学家做了相关研究,请分析回答.
(1)从早幼红细胞中提取出该蛋白质的mRNA,通过___获得cDNA片段,以该cDNA为模板进行PCR,向反应体系中加入dNTP、Taq酶及___.至少需要___个循环才能产生目的基因片段.扩增后的DNA经人工转录后获得大量的mRNA注射到爪蟾的卵母细胞中.结果与___对照组相比,实验组卵母细胞很快膨胀破裂.
(2)研究人员将纯化的水通道蛋白、KCl溶液和磷脂分子构建成球形脂质体,再将脂质体转移至蒸馏水中,发现脂质体也发生了快速膨胀破裂.此实验说明吸水是水通道蛋白的___(直接、间接)作用.
(3)目前认为,水分子跨膜运输有两种机制,一种是经过磷脂双分子层间隙的自由扩散,另一种是通过水通道蛋白的快速协助扩散.为证明后一种形式的存在,如何构建脂质体进行证明?
方法:___.
预期结果:___.
▼优质解答
答案和解析
(1)从早幼红细胞中提取出该蛋白质的mRNA,通过逆转录获得cDNA片段,以该cDNA为模板进行PCR技术,向反应体系中加入dNTP、Taq酶及引物.至少需要3个循环才能产生目的基因片段.
(2)根据题干分析可知,此实验说明吸水是水通道蛋白的直接作用.
(3)为证明水分子跨膜运输是通过水通道蛋白的快速协助扩散,可以将KCl溶液和磷脂分子构建成球形脂质体,再将脂质体转移至蒸馏水中,结果脂质体也吸水膨胀,但比有水通道时速度慢.
故答案为:
(1)逆转录(反转录)       引物         3
(2)直接
(3)将KCl溶液和磷脂分子构建成球形脂质体,再将脂质体转移至蒸馏水中           脂质体也吸水膨胀,但比有水通道时速度慢
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