（2014•辽宁模拟）人α-1-抗胰蛋白酶是治疗先天性肺纤维化囊肿、肺气肿以及呼吸窘迫综合症、特异性皮炎等疾病的特效药物．2001年，我国首例4只转有人α-1-抗胰蛋白酶的转基因羊在北京顺

Question

（2014•辽宁模拟）人α-1-抗胰蛋白酶是治疗先天性肺纤维化囊肿、肺气肿以及呼吸窘迫综合症、特异性皮炎等疾病的特效药物．2001年，我国首例4只转有人α-1-抗胰蛋白酶的转基因羊在北京顺义诞生，填补了我国α-1-抗胰蛋白酶药物市场的空白．根据题意回答下列问题：
（1）在体外，构建人α-1-抗胰蛋白酶基因的表达载体时，用到的工具有______．
（2）采用______法将构建好的基因表达载体导入受精卵，然后将受精卵移入______中继续培养得到早期胚胎，然后将其移植入受体母体的子宫．
（3）对胚胎进行性别鉴定、获得同卵双胎都需对胚胎进行分割，二者分割的不同之处在于：对胚胎进行性别鉴定时，______；若获得同卵双胎，则需______．
（4）检测人α-1-抗胰蛋白酶基因是否插入到染色体上，可从分子水平上检测，方法是______．
（5）在掌握培育转基因羊技术之前，生产人α-1-抗胰蛋白酶常用的方法是细胞工程或发酵工程．培育出转基因羊后，可以在羊奶或羊尿中分离出该药物．与此相比，试述细胞工程或发酵工程的不足之处．______．

Answer 1

（1）构建基因的表达载体时，用到的工具有工具酶及运载体．工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶，一般常用质粒做运载体．
（2）培育转基因动物时，需要一定的营养条件，诱导受精卵分裂分化形成胚胎．
（3）内细胞团是形成胚胎的关键部分．胚胎性别的鉴定只需少量的滋养层细胞，不要伤及内细胞团；若进行胚胎分割，应将内细胞团平均分割．
（4）在分子水平上检测，应该用DNA分子杂交技术．
（5）培育出转基因羊后，可以在羊奶或羊尿中分离出该药物．羊吃的是草（成本低），产出的奶、尿液均是对环境无害的物质．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶、运载体
（2）显微注射    胚胎（发育）培养液
（3）只需分割出少量滋养层细胞进行DNA分析   将囊胚阶段的内细胞团均等分割．
（4）DNA分子杂交技术
（5）成本高；易产生有害废弃物等