科研人员想研究“在胰岛素使用总量不变的前提下，胰岛素使用次数对同一组织不同细胞株克隆效率的影响”．请完成实验思路，并分析实验结果．实验材料：M浓度胰岛素溶液（小鼠血浆昼

Question

科研人员想研究“在胰岛素使用总量不变的前提下，胰岛素使用次数对同一组织不同细胞株克隆效率的影响”．请完成实验思路，并分析实验结果．
实验材料：M浓度胰岛素溶液（小鼠血浆昼夜平均胰岛素浓度）、培养液、小鼠皮肤生发层组织（能增殖）、胰蛋白酶、3种抗体、生理盐水等．（要求与说明：答题时不考虑加入胰岛素溶液后的培养液体积变化等误差；不同浓度的胰岛素溶液加入细胞培养液的间隔时间为24小时；抗体能识别特定的膜蛋白质，但不损伤细胞）
（1）实验思路：
①向有小鼠皮肤生发层组织的培养液中加入______获得单细胞悬浮液，再转入特殊培养液中进行原代培养，然后将其分成3瓶，并在每瓶中加入______从而获取3种特殊细胞，分别命名为细胞株1、2、3．
②将M浓度胰岛素溶液分别稀释到原浓度的(1)/(2)、(1)/(3)，备用．
③实验分组及操作．若实验在适宜条件下进行72小时，以细胞株1为例，将细胞株1均分为3份实验，请完成表格．

细胞株类型	胰岛素浓度	加入胰岛素次数	检测内容
细胞株1	______	______	______
	(M)/(2) (M)/(2)	______
	(M)/(3) (M)/(3)	______

（2）实验分析：
①本实验用克隆化细胞株而不是原代培养物作实验材料，原因是克隆化细胞株中的细胞具有______ 的特点，这样可以减少实验误差．
②按照上述实验操作，可能还会产生一定的误差，改进的办法是______．

Answer 1

（1）①肿瘤组织的细胞之间有一些蛋白质类物质，根据酶的专一性，培养之前，肿瘤组织必须先用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）等处理成单个细胞．获得单细胞悬浮液后，再转入特殊培养液中进行原代培养，然后将其分成3瓶，并在每瓶中加入一种抗体从而获取3种特殊细胞，分别命名为细胞株1、2、3．③实验的目的是为了研究在胰岛素使用总量不变的前提下，胰岛素使用次数对同一组织不同细胞株克隆效率的影响．因此胰岛素浓度为M，加1次胰岛素；胰岛素浓度为(M)/(2)，分2次加胰岛素；胰岛素浓度为(M)/(3)，分3次加胰岛素．培养30小时后，检测每培养瓶中的细胞数量．
（2）①克隆化细胞株中的细胞具有遗传物质均一，表现性状相似（或同质性/生理特征相同）的特点，这样可以减少实验误差．因此本实验用克隆化细胞株而不是原代培养物作实验材料．
②上述实验操作中，还可以改进的办法是每个实验组再增加若干个样品（或重复上述实验步骤若干次），求平均细胞总数，减少实验偶然因素引起的误差．
故答案为：
（1）①胰蛋白酶         一种抗体
③

（2）①遗传物质均一，表现性状相似（或同质性/生理特征相同）
②每个实验组再增加若干个样品（或重复上述实验步骤若干次），求平均细胞总数