如题：分光光度法中有一个公式吸光度A=εbc,现在知道A和b,并且已知ε是摩尔吸收系数,且在温度,波长一定是是常数,谁能告诉我下在20°C,350nm波长时的ε是多少.也就是说，知道了香兰素的吸光

Question

如题：分光光度法中有一个公式吸光度A=εbc,现在知道A和b,并且已知ε是摩尔吸收系数,且在温度,波长一定是是常数,谁能告诉我下在20°C,350nm波长时的ε是多少.
也就是说，知道了香兰素的吸光度A以及b，怎么求出c？

Answer 1

两种方法：
一是：1、配制香兰素的标准溶液（已知准确浓度的溶液）,取其适量按显色要求配制成浓度由低到高、等体积的一个标准系列（一般要求5个以上,包括背景空白一个）
2、在你的温度条件、波长条件下测定每个标准的吸光度A.
3、绘制A-C工作曲线（纵坐标为A,横坐标为c）.
4、将样品同上述显色方法配制,在你的温度条件、波长条件下测定样品的吸光度Ax,在工作曲线上找到Ax对应的c就是这个样品的浓度cx.
二是：1、配制香兰素的标准溶液（已知准确浓度的溶液）,取其适量按显色要求配制成与样品浓度相近的一个标准溶液,外加一个背景空白溶液.
2、在你的温度条件、波长条件下测定标准的吸光度A.
3、通过公式A=Kbc,可计算出 K=A/(bc),如果c的单位是摩尔浓度（mol/L),b的单位是厘米（cm),K就是摩尔吸光系数.
4、将样品同上述显色方法配制,在你的温度条件、波长条件下测定样品的吸光度Ax,通过公式Ax=Kbcx,代入K计算公式,cx=Ax/(Kb) =(Ax c)/A 得到样品的浓度cx.
第一种方法好于第二种方法,误差小一些.
有关详情可查阅 分析化学 分光光度法 吸光光度法