人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外，还含有含氨苄青霉素抗性基因．若lacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝

Question

人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外，还含有含氨苄青霉素抗性基因．若lacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若lacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落．此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功．如图所示是利用基因工程生产胰岛素的示意图，据图回问题． 

（1）获得胰岛素基因有两条途径：一是以mRNA为模板，在___ 酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成cDNA；二是根据胰岛素的___ 序列，推测其DNA的___序列，再通过化学方法合成所需基因．采用PCR技术在短时间内能获得较多的目的基因，该技术原理是___．
（2）图中的培养基中除含有大肠杆菌必须营养成分外，还应加入___等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．
（3）为检验大肠杆菌是否导入质粒及质粒的种类，将经增殖培养的大肠杆菌接种到培养基上．若不形成菌落，说明质粒没有导入；若菌落为白色，说明导入的是___；若菌落为蓝色，说明导入的是___．
（4）如果检验发现目的基因被成功导入了受体细胞，但却没有检测到胰岛素，应考虑位于目的基因首端和末端的___是否设计好，并进一步修饰．

Answer 1

（1）获得目的基因有两条途径：一是以目的基因的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的...