经实验发现0.5mg/L6-BA和0.3mg/LIAA的配比能诱导某菊花品种茎尖外植体再生丛芽比率达70%，再生丛芽外植体上的丛芽平均数达5.3个，适当降低IAA浓度或不含IAA，效果是否不同呢？有人利用所提供

Question

经实验发现0.5mg/L6-BA和0.3mg/LIAA的配比能诱导某菊花品种茎尖外植体再生丛芽比率达70%，再生丛芽外植体上的丛芽平均数达5.3个，适当降低IAA浓度或不含IAA，效果是否不同呢？有人利用所提供的0.5mg/L6-BA和浓度分别为0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L的IAA进行探究．请回答有关问题：
实验思路：
①配制适宜的培养基，分成若干组，灭菌
②往培养基中各加入适量的0.5mg/L6-BA，并分别依次加入等量的0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L的IAA
③分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的某菊花品种茎尖外植体
④在适宜条件下培养一段时间后，统计并计算再生丛芽外植体的比率
（1）指出上述实验思路的2处不足之处并改正______，______．
（2）本实验的实验原理是
①______②______
（3）制备菊花原生质体时，一般应将组织放在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液中用纤维素酶和果胶酶混合液处理，0.5～0.6mol/L甘露醇溶液的作用是______，原生质体再生出细胞壁时______（填两种细胞器）的活动明显增强．

Answer 1

（1）按照实验设计的单一变量原则和对照原则可知，题干给出的实验设计思路缺乏只含-6BA，不含IAA的对照实验，应添加一组加入适量的0.5mg/L的6-BA，并加入等量的蒸馏水作为对照实验；实验思路④中只统计了再生丛芽外植体的比率，应该先统计外植体上的丛芽数，并求平均数，再统计、计算再生丛芽外植体的比率．
（2）该实验的实验原理是植物生长发育是多种激素协调作用的结果，细胞分裂素与生长素浓度配比会影响外植体的分化；植物细胞具有全能性；能否再生丛芽可以看出激素配比可否诱导外植体的分化，丛芽比率和平均数可反映诱导的最佳配比．
（3）制备菊花原生质体时需要除去细胞壁，植物细胞壁由纤维素和果胶组成，因此可以用纤维素酶和果胶酶除去植物细胞壁，0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液的作用是维持一定的渗透压，保持原生质体的形态；植物细胞壁的形成与高尔基体密切相关，在细胞壁形成过程中需要消耗能量，线粒体是有氧呼吸的主要场所，因此原生质体再生出细胞壁时高尔基体、线粒体的活动明显加强．
故答案应为：
（1）缺乏对照组，应该增加一组加入适量的0.5mg/L的6-BA，并加入等量的蒸馏水作为对照；统计指标少了一个，应该要统计外植体上的丛芽数，并求平均数．
（2）多种激素的平衡协调作用，控制着植物的生长和发育；细胞分裂素与生长素浓度配比会影响外植体的分化，菊花茎尖细胞具有全能性；能否再生丛芽可以看出激素配比可否诱导外植体的分化，丛芽比率和平均数可反映诱导的最佳配比
（3）维持一定的渗透压    高尔基体、线粒体