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原核表达,得不到目的条带怎么办?做过IPTG梯度,时间是OD600以后4h,没有没有就是没有怎么办?
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原核表达,得不到目的条带怎么办?
做过IPTG梯度,时间是OD600以后4h,没有没有就是没有怎么办?
做过IPTG梯度,时间是OD600以后4h,没有没有就是没有怎么办?
▼优质解答
答案和解析
转化完成,诱导表达之后先做DNA水平的检测,再做蛋白水平的检测
如果DNA水平的检测没有检测到目的基因,那就是转化不成功.如果DNA检测到了,说明你的启动子有问题,或者启动子后面有碱基突变导致移码,这样就需要检查转化之前你的质粒测序图谱了,也许有突变或者碱基缺失你没有注意到
如果DNA水平的检测没有检测到目的基因,那就是转化不成功.如果DNA检测到了,说明你的启动子有问题,或者启动子后面有碱基突变导致移码,这样就需要检查转化之前你的质粒测序图谱了,也许有突变或者碱基缺失你没有注意到
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