人生成激素（hGH）可以刺激身体生长，在临床上有重要应用，hGH来源十分有限，起初只能从人尸体的脑垂体中提取，远不能满足临床用药要求．现代基因工程为该激素的生产带来了生机，下

Question

人生成激素（hGH）可以刺激身体生长，在临床上有重要应用，hGH来源十分有限，起初只能从人尸体的脑垂体中提取，远不能满足临床用药要求．现代基因工程为该激素的生产带来了生机，下图为通过体外大量培养微生物来大量产出人生长激素（hGH）的过程．据图回答下列问题：

（1）过程①为___，需要___的催化．
（2）过程②为___，需要的工具为___，该过程形成的结构a中除图中所示部分外至少还应包括___．
（3）为提高过程③的转化效率，需要用___处理大肠杆菌．该过程中所用的受体大肠杆菌中至少不应含有___基因，这样在过程④初次筛选时可将培养基中加抗生素B，存活下来的大肠杆菌只有___种，以便进行进一步筛选．
（4）转基因大肠杆菌培育成功的标志是___．

Answer 1

（1）过程①表示通过mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下，进行逆转录获取目的基因．
（2）过程②是将目的基因与质粒进行重组，为基因表达载体的构建，需要限制酶和DNA连接酶．该过程形成的结构a中除图中所示的标记基因外，至少还应包括启动子和终止子．
（3）为提高过程③的转化效率，需要用Ca²⁺处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞．由于目的基因插入到抗生素A抗性基因中，破坏了抗生素A抗性基因，使其不能表达，这样在过程④初次筛选时可将培养基中加抗生素B，存活下来的大肠杆菌只有导入了普通质粒或重组质粒2种，以便进行进一步筛选．
（4）转基因大肠杆菌培育成功的标志是大肠杆菌细胞内合成了人生长激素．
故答案为：
（1）逆转录    逆转录酶
（2）基因表达载体的构建    限制酶和DNA连接酶    启动子和终止子
（3）Ca²⁺   抗生素B抗性   2
（4）大肠杆菌细胞内合成了人生长激素