目前临床上癌症治疗的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗．某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用．

Question

目前临床上癌症治疗的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗．某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用．他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究．
实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计数板，试管，吸管，培养皿等．
（1）其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）
a．取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用___处理，使其分散开来，配制成细胞悬液，将其均匀分成5份，置于5个培养皿中培养，分别编号．
b．取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5，并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入___，作为___组．
c．将步骤b中的配制的溶液分别置于5个培养皿中，摇匀后，在冰箱中培养一段时间．
d．在5个培养皿加入适量的胰蛋白酶处理，配制相应的细胞悬液，振荡摇匀，分别吸取适量的悬液置于___内，在显微镜下计数，记录数据．
（2）请你纠正上面这位同学操作上的错误___．
（3）另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如表：

实验组别	1	2	3	4	5
二氯二乙胺浓度（mg/ml）	0.1	0.2	0.3	0.4	0
细胞数目（个/mL）	320	275	186	96	560

a．在该实验中，自变量是___．
b．根据实验结果，你能得出的结论是___．
（4）在体外培养肿瘤细胞时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，需要提供___气体以维持PH值，还需要提供___环境，合成培养基需特别添加___．
（5）若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴（设三次的“一滴”等量）观察，发现有64个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为___h．

Answer 1

（1）a．胰蛋白酶能水解细胞表面的蛋白质，是组织细胞分散开，所以动物细胞培养常用胰蛋白酶处理．b．实验设置应遵循对照原则，所以取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5，并在1-4号试管中加入等量...