1978年，人类首次利用转基因技术生产人胰岛素，其过程大致如图所示：（1）人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过

Question

1978年，人类首次利用转基因技术生产人胰岛素，其过程大致如图所示：

（1）人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过___方法获得目的基因．
（2）β-半乳糖苷酶能将无色0NPG分解，产物呈黄色，本生产流程中β-半乳糖苷酶基因作为___，通过①和②，完成基因表达载体的构建，写出该过程处理DNA分子所需要的酶：___
（3）③表示将表达载体导入受体细胞，用Ca²⁺处理大肠杆菌，目的是使之变为___细胞，利于外源DNA侵染，④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，人体内该过程在胰岛B细胞的___中进行．

Answer 1

（1）人工合成该目的基因的方法有两种：反转录法和化学合成法，题中根据人胰岛素由A、B两条肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，再通过人工合成方法获得目的基因属于化学合成法．
（2）根据题意分析，胰岛素基因为目的基因，β-半乳糖苷酶基因为标记基因，通过①和②过程构建基因表达载体时，需要限制酶和DNA连接酶的参与．
（3）基因工程中若将基因表达载体导入大肠杆菌细胞中，则通常采用CaCl₂溶液处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，利于外源DNA侵染．胰岛素的化学本质是蛋白质，在核糖体合成后需要内质网的加工，才具有生物活性．
故答案为；
（1）人工合成
（2）标记基因    限制酶和DNA连接酶
（3）感受态   内质网