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(2012•泰州一模)为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞.消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理
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(2012•泰州一模)为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞.消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等.某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本,并提取猪的DNA.实验步骤如下:
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h.
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提.
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37.C水浴th.
④加醋酸钠和无水乙醇,4cc高速离心15min.
⑤用70qo乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA.
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是______.
(2)步骤②的目的是______.
步骤③的目的是______.
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是______,高速离心时温度保持在4℃的原因有______、______ 等.
(4)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比,请简要说明实验设计思路.______.
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h.
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提.
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37.C水浴th.
④加醋酸钠和无水乙醇,4cc高速离心15min.
⑤用70qo乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA.
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是______.
(2)步骤②的目的是______.
步骤③的目的是______.
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是______,高速离心时温度保持在4℃的原因有______、______ 等.
(4)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比,请简要说明实验设计思路.______.
▼优质解答
答案和解析
(1)细胞膜被破坏可导致细胞裂解,由于细胞膜中含有蛋白质,所以蛋白酶可以促进细胞裂解,另外表面活性剂等可以破坏细胞膜.(2)苯酚、氯仿、异丙醇混合液,可以促进蛋白质变性;RNA水解酶可以水解RNA,说明酶的专...
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