马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法．请分析并回答．（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎

Question

马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法．请分析并回答．
（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过______和______完成组织培养过程，从而形成脱毒苗．此过程说明植物细胞具有______．
（2）为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内．其过程大致如下图所示．

①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了农杆菌转化法．该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的______上，然后通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞的______上．导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有______，还要用______处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程．
②该转基因马铃薯产生的配子中______ （填“一定”或“不一定”）含有目的基因．

Answer 1

（1）植物组织培养过程需经过脱分化和再分化两个过程，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性．
（2）①将外源基因导入植物体内用农杆菌转化法．该方法先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上，然后通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞的染色体DNA上． 导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，还要用Ca²⁺处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，使外源基因容易导入．
    ②由于在形成配子时同源染色体分离，配子中的染色体数目减半，所以不一定会存在导入的目的基因．
故答案为：
（1）脱分化      　  再分化      　　 全能性
（2）①T-DNA　     染色体DNA        限制性核酸内切酶和DNA连接酶（答限制酶和DNA连接酶给分）　   Ca²⁺　 
    ②不一定