对试管牛的早期胚胎进行性别鉴定，可选择某种性别的牛进行繁殖，牛的性别决定方式为XY型，雄牛Y染色体上含SRY基因，其中含127bp特定片数，β珠蛋白基因普遍存在于牛的体细胞中没改基因

Question

对试管牛的早期胚胎进行性别鉴定，可选择某种性别的牛进行繁殖，牛的性别决定方式为XY型，雄牛Y染色体上含SRY基因，其中含127bp特定片数，β珠蛋白基因普遍存在于牛的体细胞中没改基因含250bp特定片数．

（1）无菌条件下，从牛卵巢中取出卵母细胞，在培养液中进行成熟培养，获得___期的卵母细胞，将已经___的精子和培育成熟的卵母细胞供体放入受精液中进行体外受精，此时，可利用___法将外源基因导入受精卵
（2）将受精卵置于胚胎发育培养液中继续培养，为防止细菌等污染，培养液中需加入___
（3）将培养至桑椹胚期的8枚编为1-8号，分别取胚胎的5-6个细胞，提取DNA，设计引物，利用PCR技术扩增SRY基因和β珠蛋白基因特定片段，对扩增产物进行凝胶电泳，结果如图所示，图中M为100bp梯度DNA分子量标记，图中标记为10、11电泳带的作用是___，编号为___胚胎性别鉴定为雄性
（4）将经过胚胎鉴定的8枚胚胎移植于经___处理的受体母牛子宫内，随胚胎发育和牛犊出生，可进一步验证所鉴定的性别．

Answer 1

（1）体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应受精溶液或获能液中受精．从卵巢中采集的卵母细胞一般培养到MⅡ成熟后才与精子共同培养完成受精．在基因工程中，受体细胞是动物细胞，常用显微注射法将外源基因导入受体细胞．
（2）早期胚胎培养时，还需要加入动物血清等天然成分．为防止细菌等污染，培养液中需加入抗生素．
（3）利用PCR技术扩增SRY基因和β珠蛋白基因特定片段，对扩增产物进行凝胶电泳，结果如图所示，β珠蛋白基因普遍存在于牛的体细胞中没改基因含250bp特定片数，图中标记为10、11电泳带的作用是对照，由于雄牛Y染色体上含SRY基因，用SRY特异性探针对扩增产物进行检测，若形成杂交带，则说明其含有SRY基因（位于Y染色体上性别决定基因），则胚胎的性别为雄性．因此编号为1、4、5、7、8 胚胎性别鉴定为雄性．
（4）将经过胚胎鉴定的8枚胚胎培养到囊胚期或囊胚，直接移植到同期发情受体的子宫，使之继续发育为新个体．
故答案为：
（1）MⅡ获能   显微注射
（2）抗生素
（3）对照         1、4、5、7、8
（4）同期发情