番茄果实后熟问题是影响番茄生产、加工和运输的难题．ACC合成酶是合成乙烯的关键酶，由ACC合成酶基因控制合成．请回答下列问题：（1）从成熟红番茄果实细胞中提取ACC合成酶基因的mRNA

Question

番茄果实后熟问题是影响番茄生产、加工和运输的难题．ACC合成酶是合成乙烯的关键酶，由ACC合成酶基因控制合成．请回答下列问题：

（1）从成熟红番茄果实细胞中提取ACC合成酶基因的mRNA，逆转录成DNA单链，此时需要___（填酶）．对此DNA单链进行PCR扩增，合成ACC合成酶基因时，需要的原料为___．
（2）将人工合成的ACC合成酶基因反向接在启动子之后，构成反义ACC合成酶基因．若ACC合成酶基因转录时，两条单链（a链、b链）中的a链为模板链，则反义ACC合成酶基因转录时的模板链为___链，此时细胞内ACC合成酶基因的___（复制/转录/翻译）过程受阻．
（3）将反义ACC合成酶基因导入番茄细胞后，能否用放射性物质标记的ACC合成酶基因做探针，检测转反义ACC基因是否整合到番茄植株的染色体DNA上？为什么？___．
（4）若转反义ACC合成酶基因在番茄细胞内染色体上的位置如图1所示，则甲、乙、丙、丁番茄的自交后代中，耐贮存番茄的比例最髙的为___．
（5）图2为普通番茄和转反义ACC合成酶基因番茄乙烯释放量的测定结果，图中番茄___的曲线为普通番茄的乙烯释放量，番茄___适于储存和运输．

Answer 1

（1）从成熟红番茄果实细胞中提取ACC合成酶基因的mRNA，逆转录成DNA单链，此过程为逆转录，所以需要逆转录酶催化．由于DNA分子的基本组成单位是脱氧核苷酸，所以对此DNA单链进行PCR扩增，合成ACC合成酶基因时，需要的原料为四种脱氧核苷酸．
（2）将人工合成的ACC合成酶基因反向接在启动子之后，构成反义ACC合成酶基因．若ACC合成酶基因转录时，两条单链（a链、b链）中的a链为模板链，则反义ACC合成酶基因转录时的模板链为b链，合成的RNA能互补配对，进行杂交．此时没有mRNA单链与核糖体结合，导致细胞内ACC合成酶基因的翻译过程受阻．
（3）将反义ACC合成酶基因导入番茄细胞后，由于番茄细胞内本来存在ACC基因，能ACC基因探针发生分子杂交，所以不能用放射性物质标记的ACC合成酶基因做探针，检测转反义ACC基因是否整合到番茄植株的染色体DNA上．
（4）若转反义ACC合成酶基因在番茄细胞内染色体上的位置如图1所示，则甲、乙、丙、丁番茄产生的配子中含转反义ACC合成酶基因的概率分别为(1)/(2)、1、(3)/(4)、(1)/(2)，所以自交后代中，耐贮存番茄的比例分别为1-(1)/(2)×(1)/(2)=(3)/(4)、1、1-(1)/(4)×(1)/(4)=(15)/(16)、1-(1)/(2)×(1)/(2)=(3)/(4)，其中最髙的为乙．
（5）图2为普通番茄和转反义ACC合成酶基因番茄乙烯释放量的测定结果，图中番茄A的曲线为普通番茄的乙烯释放量，番茄B的乙烯释放量很低，适于储存和运输．
故答案为：
（1）逆转录酶     四种脱氧核苷酸
（2）b   翻译
（3）不能，番茄细胞内本来存在ACC基因，能ACC基因探针发生分子杂交
（4）乙
（5）A       B