2011年，荷兰皇家航空公司宣布，从9月份起，启用以生物柴油（即俗称的“地沟油”）为燃料的客机执飞阿姆斯特丹至巴黎的航班，以减少碳排放．科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的

Question

2011年，荷兰皇家航空公司宣布，从9月份起，启用以生物柴油（即俗称的“地沟油”）为燃料的客机执飞阿姆斯特丹至巴黎的航班，以减少碳排放．科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，可以将地沟油提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油．

（1）用培养基培养微生物时，培养基中应有___、___、___  和___等营养，同时还必须满足微生物生长对___、___、___  的要求．在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用___培养基，可以在培养基中添加___作为唯一碳源．
（2）培养基灭菌采用的最适方法是___法．
（3）图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图，过程一的接种方法是___，过程二的接种方法是___，此方法计数的微生物M的数目___（>、=、<）实际活菌数，接种后应注意培皿基要___放置．

Answer 1

（1）微生物的培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子等．同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、pH、氧气的要求．已知脂肪酶能够催化脂肪水解为脂肪酸和甘油，筛选产脂肪酶的微生物时，宜用植物油作为培养基中的唯一碳源，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基．
（2）培养基一般有高压蒸汽灭菌法灭菌．
（3）接种微生物常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法，获得图过程一的接种方法是平板划线法，过程二的接种方法是稀释涂布平板法．用稀释涂布平板法计数比实际值偏小．接种后应注意将培皿基倒置放置．
故答案为：
（1）水、无机盐、碳源、氮源  特殊营养物质 pH 氧气 选择 植物油
（2）高压蒸汽灭菌
（3）平板划线法   稀释涂布平板法<倒置