细胞培养自制血清我现在想从小鼠取血提取血清,用来培养细胞,例如293T,Huh7等.1,需要过滤和高温灭活吗?二者的先后顺序是怎么样?过滤网直径是多大号?温度和时间是多久?2,可以将取自不同小

Question

细胞培养自制血清
我现在想从小鼠取血提取血清,用来培养细胞,例如293T,Huh7等.
1,需要过滤和高温灭活吗?二者的先后顺序是怎么样?过滤网直径是多大号?温度和时间是多久?
2,可以将取自不同小鼠的血清混合一块儿用吗?是一开始就混合,还是过滤及灭活后再混合?会不会立马产生补体反应?最后再混合的话,一开始各自的量太少不好操作吧?
3,能否用小鼠血清培养人的细胞?

Answer 1

为什么要用小鼠血清呢?好像正常做都是胎牛或者小牛血清吧.
1,灭活或者过滤都是为了除菌,如果过滤除菌了就不需要灭活了吧.据说只有培养 ES 细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时才推荐灭活.0.22微米的膜过滤.
2,同一物种的血清可以一起用的,应该不会发生补体反应,关键是取血后不能放太久,会溶血.
3,293T的细胞一般胎牛血清可以养,小鼠的真不清楚.