重症综合性免疫缺乏症（SCID）小鼠是患有一种严重致死性隐性遗传病的小鼠．该品系的腺苷脱氨酶（ADA）缺乏导致表现出严重的联合免疫缺陷症状，B细胞核T细功能缺失．SCID小鼠是继裸鼠（

Question

重症综合性免疫缺乏症（SCID）小鼠是患有一种严重致死性隐性遗传病的小鼠．该品系的腺苷脱氨酶（ADA）缺乏导致表现出严重的联合免疫缺陷症状，B细胞核T细功能缺失．SCID小鼠是继裸鼠（免疫缺陷动物，先天无胸腺，缺乏T淋巴细胞）出现之后，人类发现的又一种十分有价值的免疫缺陷动物．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对SCID小鼠进行基因治疗．其技术流程如图所示．

（1）步骤①核移植前为获得更多的卵母细胞，采用___处理使其超数排卵，从输卵管中冲出的卵子处于___时期，去除卵母细胞的___（结构）．
（2）培养细胞过程中，要置于C0₂培养箱中，其中C0₂的主要作用是___．
（3）图中ES细胞来自___时期的___细胞．步骤③中，需要先利用PCR技术扩增正常基因片段，可以根据正常基因的___设计引物，PCR技术中使用的酶为___．为检测目的基因是否表达，采用的方法为___．

Answer 1

（1）使用促性腺激素处理可以促使动物超数排卵以获得更多的卵母细胞；从输卵管中冲出的卵子已经发育到减Ⅱ中期，即已经成熟；核移植前要去除卵母细胞的细胞核．
（2）动物细胞培养需要一定的气体环境，即95%的空气和5%的二氧化碳，其中CO₂可以维持培养液pH值．
（3）ES细胞为胚胎干细胞，来自囊胚期的内细胞团或早期胚胎；PCR技术中的引物是根据目的基因的核苷酸序列合成的，使用的酶为Taq酶（热稳定的DNA聚合酶或耐高温的 DNA聚合酶；目的基因表达即合成相关的蛋白质，因此检测方法为抗原一抗体杂交．
故答案为：
（1）促性腺激素      减Ⅱ（MⅡ）中期      细胞核
（2）维持培养液pH值
（3）囊胚     内细胞团     碱基（脱氧核苷酸）序列      Taq酶（热稳定的DNA聚合酶或耐高温的DNA聚合酶）    抗原一抗体杂交