Ⅰ胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取．流程图为某同学利用酵母菌R获得胡萝卜素的部分流程．酵母菌R的筛选→酵母菌R的培养→菌体裂解→

Question

Ⅰ胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取．流程图为某同学利用酵母菌R获得胡萝卜素的部分流程．
酵母菌R的筛选→酵母菌R的培养→菌体裂解→离心沉淀→萃取→萃取物→胡萝卜素的鉴定
请回答下列问题：

（1）平板划线法能将聚集的菌种逐步___到培养基的表面，从而可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落．平板划线法一般不用于活菌计数的原因是___．
（2）为了探究萃取物是否是胡萝卜素，该同学将叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、萃取物和色素混合液（含4种光合色素）依次点样在滤纸的1、2、3、4、5位置（如图1所示），并进行层析，滤纸条上各色素带的位置为___（填字母）时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素．
（3）酵母菌R能分泌A、B两种酶，下如图2是某课题组关于这两种酶的实验结果：
①图中结果显示，在40℃至60℃范围内，热稳定性较好的酶是___．高温条件下酶容易失活，其原因是___．
②由图可知，若要从酵母菌R种群中筛选出能产生热稳定性高的酶的菌株，应在___的条件下培养．
③对A、B两种酶进行分离提纯，若分子量相差较大，最好采用___方法．

Answer 1

（1）平板划线法能将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，从而可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落．平板划线法得到的菌落多数不是单一菌落，菌落数远小于活菌数．所以一般不用于活菌计数．
（2）叶绿体中的色素，由于溶解度不同，在滤纸条上的扩散速率不同，扩散最快的是胡萝卜素，其次分别是叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，所以试验结果，若4位置在最上，则说明其为胡萝卜素，其次为3位置上的叶黄素，接着2位置上的叶绿素a，在滤纸条最下面是位置1上的叶绿素b．即滤纸条上各色素带的位置为B时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素．
（3）①据图2分析，自变量为温度和酶的种类（A酶及B酶），因变量为酶活性，在40℃至60℃范围内，A酶活性的变化较B酶小，说明在在40℃至60℃范围内，A酶的热稳定性较好；高温会使酶的空间结构破坏，从而使酶容易失活．
②据图2分析，A和B两种酶在温度为80℃时其中的B酶会失活，因此若要从酵母菌R种群中筛选出能产生热稳定性高的酶的菌株，应在大于或等于80℃的条件下培养．
③A、B两种酶是由酵母菌分泌，其本质都是蛋白质，对其进行分离提纯，若分子量相差较大，可采用凝胶色谱法．
故答案为：
（1）稀释分散（或分散）    得到的菌落多数不是单一菌落，菌落数远小于活菌数
（2）B         
（3）①A酶    高温使酶的空间结构破坏    
②大于或等于80℃
③凝胶色谱法