做柱层析时,装柱子的过程,是怎样的是不是拿到空柱子,现在地下垫一个棉花,然后加缓冲液除去气泡,然后加沙子,然后再加缓冲液除去气泡,然后加入填料,然后再加入缓冲液除去气泡,然后再加

Question

做柱层析时,装柱子的过程,是怎样的
是不是拿到空柱子,现在地下垫一个棉花,然后加缓冲液除去气泡,然后加沙子,然后再加缓冲液除去气泡,然后加入填料,然后再加入缓冲液除去气泡,然后再加一层沙子,然后再加缓冲液除去气泡,并且让液面淹没沙子.然后再将柱子平衡.是不是这样的步骤?

Answer 1

装柱方法分为湿法和干法,一般来说,湿法装柱的效果优于干法装柱.
湿法装柱：
先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中,使之处于有机环境.装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料,一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打,使填料紧实,然后打开旋塞放掉多余的有机溶剂即可进行样品分析.
干法装柱：
现在层析柱内填入硅烷花玻璃棉,然后用不同极性的有机溶剂对层析柱的内壁进行充分润洗,待层析柱晾干,依次填入石英砂及各种层析填料,同样,一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打,使填料紧实,然后加入一定量的有机溶剂淋洗填好的柱子,一般这个体积为柱子死体积的2倍.然后打开旋塞使淋洗液流出,即可进行样品分析.
填料紧实是保证层析柱柱效的关键,一定要注意.
层析柱最下层的棉花,我们一般是用硅烷花玻璃棉的,在马弗炉中活化即可用.如果用脱脂棉,需要用二氯甲烷抽提3遍以去除杂质,以防干扰实验.