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使用双缩脲试剂检测蛋白质时,如果蛋白质溶液稀释不够,反应结果会有沉淀粘在试管壁上,沉淀出现的原因是什么?能否加水使其溶解?为什么?
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使用双缩脲试剂检测蛋白质时,如果蛋白质溶液稀释不够,反应结果会有沉淀粘在试管壁上,沉淀出现的原因是什么?能否加水使其溶解?为什么?
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答案和解析
低浓度的盐溶液加入蛋白质溶液中,会导致蛋白质溶解度增加,称为盐溶[机理]:破坏了蛋白质的水化膜并且中和了表面的净电荷.能加水使其溶解,使蛋白质沉淀的原因不是蛋白质变性而是盐析,少量的盐溶液改变了蛋白质的溶解度,溶剂(水)的量相对不足时发生了沉淀,当加入足够的溶剂,原来析出的蛋白质重新被溶解.( 双缩脲试剂中有硫酸铜,双缩脲含有Cu2+,会导致蛋白质的聚沉,黏固在试管壁上,即盐析)
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