如图是大肠杆菌纯化培养过程中划线接种的培养结果．首先，制作牛肉膏蛋白胨培养基制备的过程有：计算→称量→溶化→调节PH→→．最后一步操作时需在附近操作，其原因是

Question

如图是大肠杆菌纯化培养过程中划线接种的培养结果．
首先，制作牛肉膏蛋白胨培养基制备的过程有：计算→称量→溶化→调节PH→ ___→ ___．最后一步操作时需在 ___附近操作，其原因是 ___，纯化大肠杆菌的原理是：在培养基上将细菌稀释或分散成 ___，使其生长成单个的菌落，其常用的方法有 ___、 ___，要求无菌操作．图中在 ___（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是 ___个细菌．据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是 ___（用编号表示）．

Answer 1

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、调整pH、灭菌、倒平板．酒精灯火焰旁为无菌区域，所以倒平板时需要在酒精灯火焰旁进行．纯化大肠杆菌的原理是：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其生长成单个的菌落，纯化接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法．分析图中的平板可知，在②区出现了由1个细菌繁殖而来的单菌落；该培养基上划线接种的顺序是①③②．
故答案为：
灭菌  倒平板   酒精灯火焰   酒精灯火焰旁为无菌区域    单个   平板划线法  稀释涂布平板法  ②一个  ①③②