科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症．下列相关实验设计中，不合理的是（）A.用β-珠蛋白编码序列加
科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症．下列相关实验设计中，不合理的是（ ）
A. 用β-珠蛋白编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体
B. 利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
C. 用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
D. 用Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
B、利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列，B正确；
C、标记基因是四环素抗性基因，因此用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌，C正确；
D、标记基因是四环素抗性基因，因此受体细胞不能具有四环素抗性，即用Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导入不具有四环素抗性的大肠杆菌中，D错误．
故选：D．
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