如图为银川环保部门对艾依河段的大肠杆菌进行检测的操作和配方图．据图回答下列相关问题：（1）图甲中滤膜的孔径应（填“大于”或“小于”）大肠杆菌．（2）配制图乙中的基础培

Question

如图为银川环保部门对艾依河段的大肠杆菌进行检测的操作和配方图．据图回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应___（填“大于”或“小于”）大肠杆菌．
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入___．待各成分都熔化后，调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近___．大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于___培养基．
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是___．
（4）要检测样液中的大肠杆菌含量，取1ml河水样本，加入4ml无菌水，充分混匀后，在3个平板上用涂布平板法分别接入0.1ml样液，在37℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为51、50、49．据此可得出1ml河水样本中活菌数为___个．
（5）该小组通过统计菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值比实际值___（偏高/偏低），理由是___．

Answer 1

（1）分析图解可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，即图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌．
（2）培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，图中乳糖为碳源，因此培养基中还应该加入氮源．待各成分都熔化后，调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板．大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于鉴别（鉴定）培养基．
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落．
（4）取1ml河水样本，加入4ml无菌水，说明稀释倍数为5倍；根据根据题干数据，可以计算1ml河水样本中活菌数=（51+50+49）÷3÷0.1×5=2500个．
（5）由于培养基中两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落，因此理论上他们的统计值比实际值偏低．
故答案为：
（1）小于   
（2）氮源（蛋白胨）     倒平板     鉴别（鉴定）
（3）将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落    
（4）2.5×10³（或2500）
（5）偏低  两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落