斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码．具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光．利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合斑马鱼17号染色体．带有G基因的胚胎能够发出

Question

斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码．具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光．利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合斑马鱼17号染色体．带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光．未整合G基因的染色体对应位点表示为g．用个体M和N进行如下杂交实验．

（1）在上述转基因实验中，将G基因与______重组，需要的两类酶有和______．将重组质粒成功地显微注射到斑马鱼受精卵中，胚胎没有发出绿色荧光，说明______．
（2）杂交后，出现红﹒绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代______（填“M”或“N”）的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中，同源染色体的______发生了交换，导致染色体发生______．
（3）根据上述杂交实验推测：子代中只发出绿色荧光的个体与只发出红色荧光的个体杂交，产生的后代个体中发红﹒绿荧光的概率是______．

Answer 1

（1）由题目可知，转基因的过程是用到同一种限制性核酸内切酶去切割目的基因和运载体，再DNA连接酶，构建基因表达载体，将重组质粒用显微注射法导入动物细胞受精卵，整合后的G如果得到表达，胚胎会发出绿色荧光．胚胎如果没有发出绿色荧光，说明荧光基因未成功表达．
（2）M（Ddgg）×N（DdGg）→红•绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎，可能是亲代N的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中，同源染色体的非姐妹染色单体发生了交换，导致染色体上的基因重组．
（3）杂交试验是应用孟德尔的遗传规律，十七号染色体上存在等位基因D，d，有纯合基因dd存在的时候，胚胎红色荧光，D_无红色荧光．转基因G_表达绿色荧光和D在同一条染色体上连锁，没有绿色荧光的基因型是gg．

由于N的基因型是DdGg，因此可推知亲代M的基因型是Ddgg，子代只发出绿色荧光的胚胎基因型包括：DDGg，DdGg．基因型为DDGg的个体与子代中红色荧光个体（ddgg）杂交，不可能产生ddGg后代；由于DdGg的基因分布为DG∥dg，因此它与子代中红色荧光个体（ddgg）杂交，也不可能产生ddGg后代．
故答案为：
（1）运载体（或质粒）   限制酶（或限制性内切酶或限制性核酸内切酶）、DNA连接酶    荧光基因未成功表达
（2）N    非姐妹染色单体   基因重组
（3）0