苦荞是一种有名的经济植物，其含有的黄酮类化合物具有降血糖、血脂等功效．CHS是合成黄酮类化合物的关键酶．有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中，培育高产黄酮苦荞品系．按图示回

Question

苦荞是一种有名的经济植物，其含有的黄酮类化合物具有降血糖、血脂等功效．CHS是合成黄酮类化合物的关键酶．有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中，培育高产黄酮苦荞品系．按图示回答：

（1）过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒的酶称为___．这种酶主要有两类，一类是从T4噬菌体中分离得到的，另一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为___．这两类酶都能恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的___键．
（2）图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为___，除此外还可以利用的方法有___．对过程②操作前，需先用Ca²⁺处理农杆菌，使其成为___细胞．
（3）检测转基因苦荞培育是否成功，不能用抗原--抗体杂交技术进行检测的原因是___，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的___含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定．

Answer 1

（1）过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒需要DNA连接酶．这种酶主要有两类，一类是从T4噬菌体中分离得到的，称为T4DNA连接酶，另一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E．coliDNA连接酶．DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（2）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法，图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞采用的是农杆菌转化法．将目的基因导入微生物细胞需要采用感受态细胞法，即需先用Ca²⁺处理农杆菌，使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞．
（3）检测转基因苦荞培育是否成功，不能用抗原--抗体杂交技术进行检测，原因是转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定．
故答案为：
（1）DNA连接酶      E．coliDNA连接酶    磷酸二酯
（2）农杆菌转化法    基因枪法、花粉管通道法    感受态
（3）转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物      黄酮类化合物