（2010•江苏二模）酵母茵生长的最适宜温度在20℃～30℃之间，能在pH值为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖．大约每1.5～2小时增殖一代．某研究性学

Question

（2010•江苏二模）酵母茵生长的最适宜温度在20℃～30℃之间，能在pH值为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖．大约每1.5～2小时增殖一代．某研究性学习小组据此探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化，进行了如下实验，实验操作步骤如下：
第一步：配制无菌马铃薯葡萄糖培养液和活化酵母茵液．
第二步：利用相同多套装置，按下表步骤操作．

装置编号		A	B	C	D
装置容器内 的溶液	无菌马铃薯葡萄糖培养液/mL	10	1O	5	5
	无菌水/mL	-	-	5	5
	活化酵母菌液/mL	0.1	0.1	0.1	0.1
温度（℃）		5	25	5	25

第三步：用血球计数板计数装置中起始酵母菌数目，做好记录．
第四步：将各装置放在其它条件相同且适宜的条件下培养．
第五步：连续7天，每天随机抽时间取样计数，做好记录．
回答下列问题：
（1）改正实验操作步骤中的一处错误______．
（2）某同学第5天在使用血球计数板计数时做法如下：
①振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释（稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液）
②先将______放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液．滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液______，制作好临时装片．
③显微镜下观察计数：在观察计数时只记______（被、不被）染成蓝色的酵母菌．
（3）如所使用的血球计数板有16个中方格，每l中方格中有25个小方格，计数室的容积为0.1mm^3（1mL=1000mm³）．请推导出1毫升培养液中酵母菌细胞的计算公式：酵母细胞个数/1mL=______．

Answer 1

（1）第五步中“每天随机抽时间取样计数”应改为“每天同一时间（定时）取样”，这样每天取样时间间隔相同，是所得的实验数据更加准确，画出的变化曲线更加具有参考价值．
（2）②在对酵母菌数量进行抽样检测时，首先振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释，然后将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液．滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸（吸水纸）吸去，制作好临时装片．
③在显微镜下观察计数时，由于死的酵母菌细胞膜失去选择透过性，因此被染成蓝色，而活的酵母菌不会被染色，因此计数时只记不被染成蓝色的酵母菌．
（3）血球计数板有16个中方格，每l中方格中有25个小方格，即总共有16×25=400个小方格．计数室的容积为0.1mm^3（1mL=1000mm³），每个小方格的体积为(0.1)/(400)mm³因此酵母细胞个数/1mL=平均每个小方格的酵母菌数÷每1个小方格容积×稀释倍数=平均每个小方格的酵母菌数×400×10⁴×稀释倍数．
故答案为：
（1）第五步中应每天同一时间（定时）取样．
（2）②盖玻片  用滤纸（吸水纸）吸去  ③不被
（3）平均每个小方格的酵母菌数×400×10 ⁴×稀释倍数