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酶切——构建载体一直失败,目前想重新检测酶切问题刚刚做了两种酶的单酶切40微升的体系打算1小时后进行电泳观察,请问是否可以直接在酶切样品中取样进行电泳?还是需要做几步处理我是
题目详情
酶切——
构建载体一直失败,目前想重新检测酶切问题
刚刚做了两种酶的单酶切40微升的体系
打算1小时后进行电泳观察,请问是否可以直接在酶切样品中取样进行电泳?还是需要做几步处理
我是这么想的,直接取20微升加10*loading buffer跑电泳,可以么?那么剩下的该怎么处理?是再加第二种酶以做两步酶切?
还有就是我的电泳比较模糊,同条件(缓冲液、电压、EB)跟别人的图谱比起来有些不清楚,是不是很大问题在于我的加样呢?
构建载体一直失败,目前想重新检测酶切问题
刚刚做了两种酶的单酶切40微升的体系
打算1小时后进行电泳观察,请问是否可以直接在酶切样品中取样进行电泳?还是需要做几步处理
我是这么想的,直接取20微升加10*loading buffer跑电泳,可以么?那么剩下的该怎么处理?是再加第二种酶以做两步酶切?
还有就是我的电泳比较模糊,同条件(缓冲液、电压、EB)跟别人的图谱比起来有些不清楚,是不是很大问题在于我的加样呢?
▼优质解答
答案和解析
电泳模糊先检查你的做胶问题.一定要等完全凝固了才能用.
拔出梳子后你可以看一下加样孔,如果孔底部是矩形,边角分明的就是好的,如果是弧形的就是不好的,跑出来没条带都有可能.
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